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自2006年以來，我們一直利用定制生產(chǎn)的蛋白質(zhì)推動(dòng)研究取得成功，并期待提供高質(zhì)量的蛋白質(zhì)來幫助您實(shí)現(xiàn)研究目標(biāo)。
RayBiotech的蛋白質(zhì)生產(chǎn)服務(wù)有:
○ 全面——我們可以為您提供從基因合成到蛋白質(zhì)純化等各個(gè)方面的幫助。我們的服務(wù)包括脫鹽、等分、凍干和結(jié)合。
○ 快速——您將在3周內(nèi)獲得細(xì)菌表達(dá)的蛋白質(zhì)，在6-8周內(nèi)獲得昆蟲表達(dá)的蛋白質(zhì)，在3-6周內(nèi)獲得哺乳動(dòng)物表達(dá)的蛋白質(zhì)。
○ 易于擴(kuò)展——首次純化蛋白質(zhì)后，我們可以根據(jù)需求擴(kuò)大培養(yǎng)以獲得您所需要的蛋白量。
○ 高品質(zhì)——純度經(jīng)SDS-PAGE測定，我們通常達(dá)到>95%的純度。
○ 無風(fēng)險(xiǎn)——我們分階段推進(jìn)項(xiàng)目。您將收到每個(gè)階段的進(jìn)展通知。您只需為成功完成的里程碑付費(fèi)。
○ 價(jià)格實(shí)惠。
準(zhǔn)備好讓我們開始開發(fā)您的重組蛋白服務(wù)了嗎？
請求報(bào)價(jià)| 細(xì)菌 |
昆蟲細(xì)胞 (桿狀病毒) |
動(dòng)物細(xì)胞 (TruExp?) |
|
|---|---|---|---|
| 概況 | 細(xì)菌基因表達(dá)是一種快速且經(jīng)濟(jì)高效的生產(chǎn)重組蛋白的方法。 | 桿狀病毒昆蟲細(xì)胞基因表達(dá)易于從實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)大到大規(guī)模生產(chǎn)系統(tǒng)。然而，盡管表達(dá)的蛋白質(zhì)具有豐富的PTM，但修飾的類型和模式與在哺乳動(dòng)物系統(tǒng)中表達(dá)相同蛋白質(zhì)時(shí)所見的不同。 | 哺乳動(dòng)物基因表達(dá)是產(chǎn)生哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)天然構(gòu)象和PTM的最佳選擇。 |
| 細(xì)胞類型 | E. Coli | Sf9, HighFive | TruExp? 哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)(基于Human HEK293 suspension cells) |
| 表達(dá)水平 | 低-中-高 | 低-高 | 低-中-高 |
| 細(xì)胞增殖速度 | 快 (30 mins) | 慢 (18-24 hr) | 慢 (24 hr) |
| 費(fèi)用 | $ | $ - $$$ | $ - $$$ |
| 耗時(shí) | 3 周 | 6 - 8 周 | 3 - 6 周 |
| 翻譯后修飾 | |||
| 蛋白折疊 | Not reliable | Reliable | Reliable |
| 糖基化 | No | Simple | Complex |
| 磷酸化 | No | Yes | Yes |
| 乙?；? | No | Yes | Yes |
| ?；? | No | Yes | Yes |
| γ-羧基化 | No | No | Yes |
見證我們專有的TruExp?哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)系統(tǒng)的強(qiáng)大功能。
TruExp? 是RayBiotech最先進(jìn)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，用于生產(chǎn)具有天然構(gòu)象和PTM的重組蛋白。 TruExp? 對(duì)于高分子量或難以表達(dá)的蛋白質(zhì)來說，是一個(gè)很好的選擇。
我們推薦用 TruExp? 哺乳動(dòng)物基因表達(dá)系統(tǒng)助您達(dá)成下列目標(biāo):
- 分泌型表達(dá)—表達(dá)的蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中（圖1），這有助于實(shí)現(xiàn)高純度水平（圖2）；與從高度污染的裂解液中回收蛋白質(zhì)相比，這種方法更為優(yōu)越。
- 復(fù)雜，包含豐富PTM的表達(dá)—例如，豐富的糖基化對(duì)于賦予蛋白質(zhì)功能至關(guān)重要（圖3）。
- 高表達(dá)量—典型的產(chǎn)量范圍是每升培養(yǎng)液可純化2-355毫克蛋白質(zhì)（表2）。
- 無生物危害風(fēng)險(xiǎn)—無血清培養(yǎng)基和無動(dòng)物源材料的使用消除了生物危害風(fēng)險(xiǎn)。
圖1. TruExp哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)系統(tǒng)提供高水平的蛋白質(zhì)表達(dá)。六個(gè)不同的人類基因（H1-6）和三個(gè)小鼠基因（M1-3）通過TruExp表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行了表達(dá)。將細(xì)胞培養(yǎng)上清液（10 μL）應(yīng)用于12% SDS-PAGE (A) 并通過抗His標(biāo)簽單克隆抗體進(jìn)行Western blot檢測 (B)。除了基因H6和M2外，所有過表達(dá)的基因均顯示出額外的分泌蛋白條帶 (A, 紅色箭頭)。所有基因均得到表達(dá)，部分顯示了豐富的翻譯后修飾，表現(xiàn)為與預(yù)測大小相比分子量增加 (B, 黃色箭頭)。M = 蛋白標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記物 (kDa)。
圖2. 在TruExp哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)的蛋白質(zhì)是全長且高度純化的。從轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)上清液中親和純化的重組蛋白顯示出高純度及完整的蛋白條帶，即使在分子量大于100 kDa的情況下也是如此。M = 蛋白標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記物 (kDa)。
圖3. TruExp哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)系統(tǒng)中純化的重組蛋白的去糖基化分析。相同量的純化蛋白未經(jīng)處理（第2道）或在天然條件（第3道）或還原條件（第4道）下用去糖基化酶處理。去糖基化處理導(dǎo)致蛋白質(zhì)遷移率發(fā)生變化，產(chǎn)生了一個(gè)預(yù)期大小的單一降低條帶，這表明未經(jīng)處理的重組蛋白（第2道）是被糖基化的。第1道：蛋白標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記物 (kDa)。第2道：未處理的蛋白。第3道：在天然條件下用去糖基化酶處理的蛋白。第4道：在變性條件下用去糖基化酶處理的蛋白。第5道：相同的切割反應(yīng)，但未加入蛋白。
表 2. RayBiotech TruExp哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)系統(tǒng)典型的重組人蛋白產(chǎn)量如下：
| Protein Abbreviated | Protein Name | Yield (mg/L culture) |
|---|---|---|
| SCCA2 | Serpin B4, Serpin Peptidase Inhibitor | 335.7 |
| Has | Human serum albumin | 330 |
| CT | Calcitonin | 160.8 |
| YWHAE | 14-3-3 Protein Epsilon | 103.1 |
| NT-proBNP | N-terminal of the prohormone BNP | 99.5 |
| NGAL | Lipocalin-2 | 69.1 |
| AFP | a-Fetoprotein | 63.2 |
| BNP-32 | Brain natriuretic peptide 32 | 51.2 |
| UBQN | Ubiquilin-1 | 41.3 |
| CEA | Carcinoembryonic Antigen | 39.8 |
| erbB-3 | Receptor Tyrosine-Protein Kinase erb-3 | 37.5 |
| EGFR | Epidermal Growth Factor Receptor | 23.5 |
| PGC | Pepsinogen II, Pepsinogen C | 18.6 |
| LAG-3 | Lymphocyte Activation Gene 3 Protein | 16.9 |
| Erb/Her2 | Receptor Tyrosine-Protein Kinase erbB-2 | 16.7 |
| HGF R | Hepatocyte Growth Factor Receptor | 14.6 |
| ANXA2 | Annexin A2 | 11.8 |
| GP73 | Golgi Membrane Protein 1 | 5.5 |
常見問題解答 我可以用自己的表達(dá)載體么？??
我的目標(biāo)基因已經(jīng)存在于質(zhì)粒中。基因可以轉(zhuǎn)移到你的表達(dá)載體中嗎？
我可以不要His標(biāo)簽換其他標(biāo)簽或者完全去除標(biāo)簽么？
